吴翠霞 路兴涛 马冲 孙竹波 孔繁华
摘要：为明确山东省济宁市鱼台县稻茬麦区菵草对炔草酯的抗性水平，采用温室盆栽法和培养皿法，分别测定14个稻茬麦田菵草对炔草酯的抗性水平。结果表明，温室盆栽法和培养皿法测得的菵草对炔草酯抗性趋势基本一致，除采自王庙镇南房村路边的菵草仍处于敏感状态外，其余种群均对炔草酯产生了较高水平的抗性。在13个抗性种群中，中抗种群4个，高抗种群9个，其中老寨乡张埝村的3个种群抗性水平相对较高，温室盆栽法的抗性倍数分别为763.75、2278.85、4411.79，培养皿法下的抗性倍数分别为313.75、394.50、624.00。
关键词：稻茬麦区；菵草；炔草酯；抗药性
中图分类号：S451文献标志码：A文章编号：1003-935X（2016）02-0045-04
山东省小麦田杂草因气候、种植模式不同，分布也存在较大差异，但杂草群落主要以播娘蒿、荠菜、看麦娘、节节麦等10种杂草为主，而菵草作为区域性优势杂草，主要分布于山东省西南部平洼区的菏泽市、济宁市[1]。
菵草（Beckmanniasyzigachne），禾本科菵草属杂草，一年或越年生，种子繁殖，适生于水边及潮湿处，在长江流域及西南地区稻茬麦田和油菜田危害严重，也是山东省济宁市鱼台县单季稻作区麦田的主要杂草。历年来，菵草的防除主要以化学防治为主，主要药剂有精[XCY1.tif]唑禾草灵和炔草酯，两者作用机理相同，均为脂肪酸合成抑制剂，作用靶标为乙酰辅酶A羧化酶（acetylCoAcarboxylase，ACCase）。精[XCY1.tif]唑禾草灵作为生产中防除禾本科杂草的主要除草剂，在我国使用已近20年，对菵草的防效逐年下降，多数地区菵草已产生较高抗性[2-6]。尽管炔草酯使用年限相对较短，但已有少数抗精[XCY1.tif]唑禾草灵种群对其产生交互抗性[5-6]，其中包括采自鱼台县老寨乡张埝村的抗性种群[6]。鉴于此，笔者采用温室盆栽法和培养皿法，检测了鱼台县稻茬麦区菵草对炔草酯的抗性水平，以期为菵草的有效防除提供理论支持。
1材料与方法
1.1材料
95%炔草酯原药和15%炔草酯可湿性粉剂，均购自瑞士先正达作物保护有限公司。
2014年5月，于山东省济宁市鱼台县稻麦轮作区采集14个稻茬麦田菵草种群，采集地点与用药历史见表1。
1.2试验方法
1.2.1温室盆栽法
每盆（直径12cm）播种15粒已解除休眠催芽露白的种子，覆土0.5～1.0cm，置于温室内培养，室内温度20～26℃，相对湿度（65±15）%，自然光照。以盆钵底部渗灌方式补水，保持土壤湿度。杂草1～2叶期间苗，每盆保留10株，3～4叶期采用ASS-3型农药室内喷洒系统，DG8003喷头施药，喷雾压力2.75MPa，喷液量400L/hm2，浓度为11.25、22.50、45.00、90.00、180.00ga.i./hm2，分别为田间常规用量的1/4、1/2、1、2、4倍，以喷施清水作为对照。处理1～5d后，目测杂草情况，21d后剪取杂草地上部分并称质量，计算鲜质量抑制率[7]，使用DPS7.05软件对药剂剂量的对数值x与鲜质量防效的概率值y进行回归分析，得到剂量-鲜质量防效回归方程、抑制杂草生长50%的除草剂剂量GR50（50%reductioningrowth）、置信区间及相关系数，进而计算供试杂草抗性生物型的相对抗性倍数（resistance/susceptibility，R/S）。试验重复3次。
抗性水平判定标准为敏感种群：1≤R/S<5；低抗种群：5≤R/S<10；中抗种群：10≤R/S<50；高抗种群：R/S≥50[8]。
1.2.2培养皿法
选择饱满一致的种子，自来水冲洗，30%次氯酸钠溶液消毒10min，灭菌水冲洗3～5次。消毒后的种子于无菌条件下播种在1.3%琼脂培养基平板上，每皿20粒，光照培养箱内培养。昼夜培养温度分别为20、15℃，每天光照10h，光照强度3000lx。在琼脂培养基中加入炔草酯，以梯度濃度0.005、0.050、0.250、0.500、2.500、5.000、50.000mga.i./hm2进行抗药性水平测定，以不加炔草酯为对照，7d后测量主根长，计算抑制率[9-10]，使用DPS7.05软件对药剂浓度的对数值与根长抑制率的概率值进行回归分析，得出回归方程、相关系数及抑制根长50%的除草剂浓度IC50（50%inhibitioningrowth），进而计算抗性倍数。重复3次。
2结果与分析
2.1温室盆栽法
除采自王庙镇南房村路边的菵草种群（编号4）较为敏感外，其余种群均对炔草酯产生了不同程度的抗药性，抗性倍数均在20.79～4411.79之间，其中，中抗种群4个，高抗种群9个。老寨乡张埝村采集的3个菵草种群（编号9～11）对炔草酯的抗性水平较高，抗性倍数分别为763.75、2278.85、4411.79；其次为唐马镇杨宅子村采集的种群（编号8），抗性倍数为311.51。王庙镇林庄村的2个种群（编号1、2）抗性水平也较高，抗性倍数分别为247.33、148.61，王庙镇南房村（编号3）、滨湖镇街道办事处张庙村的菵草种群（编号5、6）抗性倍数则分别为54.93、59.36、67.56。中抗水平种群中，除张皂镇杨娄村种群（编号12）的抗性倍数为41.52外，其余3个种群的抗性倍数均略大于20（表2）。
2.2培养皿法
除采自王庙镇林庄村（编号1）、王庙镇南房村路边（编号4）、唐马镇杨宅子村（编号7、8）、西外环水沟旁（编号13）的菵草种群抗性倍数<2外，其他均>2。采自老寨乡张埝村的3个种群（编号9～11）
抗性水平较高，抗性倍数分别为313.75、394.50、624.00，这与温室盆栽法的结果一致。
3讨论
杂草抗药性的发生与除草剂使用频次、农艺措施等密切相关，重复使用1种除草剂或作用机制相同的不同除草剂，在选择压力的作用下，即可产生自然抗性杂草[11]。本研究中，于山东省济宁市鱼台县稻茬麦区采集的菵草种群已经对炔草酯产生了不同程度的抗药性，其中，用药历史较长的老寨乡张埝村采集点的抗药性相对较高，这与李凌绪的研究结果[6]一致。尽管本研究中的菵草种群表现出不同程度的抗药性，但是由于采样点较少，尚不能明确该地区菵草对炔草酯的抗性分布情况，仍须进行大范围的抗性监测工作。
本研究采用温室盆栽法和培养皿法进行试验，2种方法测定的抗药性结果趋于一致，但略有差异。温室盆栽法是筛选抗性杂草的常规方法，但与培养皿法相比，后者更省时省力，培养皿法在检测杂草抗药性中的作用有待进一步研究。
杂草抗药性种群的发生不仅给杂草防除带来困难，而且在缩短除草剂使用年限的同时，给除草剂新品种的开发带来巨大压力[12-13]。山东省济宁市鱼台县抗炔草酯菵草种群是否对其它常用除草剂品种产生交互抗性，以及其抗性机制，均有待进一步研究。
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