王焕 赵文团 陈连芳
摘要：列当（Orobanche spp and Phelipanche spp ）是一种在世界范围内危害严重的根寄生杂草，防除列当的研究也越来越多。正确地采集和预培养列当种子是获得正确防除列当研究结果的前提。列出了大田正确采集列当种子的方法，以及对采集到的种子进行过筛提纯、加洗洁精和吐温0清洗后，再表面消毒和预培养，并通过发芽试验检验此方法的可行性。结果表明，经过处理的向日葵列当、瓜列当种子的发芽率最高分别为44%、91%。此方法可以应用于列当的采集和预处理过程中，可为列当研究和防除提供参考。
关键词：列当；种子；采集；预培养；独脚金内酯类似物GR4
中图分类号：41；944文献标志码：A文章编号：100-9X（01）01-00-04[7]
Abstract：roorape （Orobanche spp and Phelipanche spp） are devastating root parasitic weeds worldwide Research afforts regarding its control have increased in any areas Proper collection and preconditioning of broorape seeds is relevant roorape seed field collection techniques and procedures to sieve the seeds for purification and addition of detergent and ween 0 for cleaning as well as surface sterilization and preconditioning of the seeds are described he feasibility of these ethods were exained by gerination tests he highest gerination rate of sunflower broorape （Orobanche cuana allr） and Egyptian broorape （Phelipanche aegyptiaca Pers） using the proposed ethods were 4% and 9%，respectively，indicating that the ethod could be applied to collect and pretreat Orobanche seeds in order to provide basic inforation to farers and/or researchers working in the field for the control of broorape weedsey words：Orobanche；seeds；collection；preconditioning；GR4
列当是列当科（Orobanchaceae）列当属（Orobanche spp）的一种根寄生植物，在地中海、亚洲西部、东欧、原苏联的南部以及非洲东部等地区均有分布，它可以寄生在伞形科、菊科、茄科、豆科、十字花科、亚麻科、葫芦科、大麻科等很多植物的根部[1]。但由于自身缺乏叶绿素，列当必须从寄主中掠夺水分和各种矿质营养物质才可以满足自身的生长需要。列当拥有十分复杂的生活史，对寄主植物的危害主要发生在出土之前的地下生长阶段[-]。在相对适宜的温度和湿度下，成熟的列当种子才能够对萌发刺激物质产生反应，这一阶段被称为列当种子的预培养。在适宜的环境条件下，种子的萌发还必须经过发芽刺激物质的诱导才能够开始，若没有发芽刺激物质的诱导即没有寄主生长的情况下，约 1～周后列当种子将会进行二次休眠，等待来年有寄主时再萌发，这是列当植物对环境的一种进化适应性选择[4-]。因此，如何采集和预处理列当种子是列当研究的基础。有研究表明向日葵列当种子大小一般为00～400 μ，千粒质量仅1～ g[]，但这一研究结论并未经过严谨的试验计数与统计处理，因此没有科学参考性。目前国内关于列当种子采集与预处理这方面并无确切的文献报道；而国际上也仅有以色列教授oel等做过7株向日葵列当的大致统计，他们的研究指出，7株向日葵列当的种子总和超过100万粒[7]。在正确的采集和预处理列当种子的基础上，本项目组进行了大量的关于列当生物防除方面的试验，其中主要是对于列当诱捕作物的研究，并发表了多篇文章，研究表明，小麦可以作为小列当的诱捕作物[-10]，玉米、大豆、棉花和柳枝稷均可作为向日葵列当的诱捕作物[11-14]。本项目组也多次向国内相关单位无偿提供列当种子作为研究材料，促使其完成相关领域的研究，例如，Chai等研究出百合对瓜列当具有化感作用，可以作为瓜列当的诱捕作物[1]；同时hang等研究出根寄生植物列当和茎寄生植物菟丝子通过基因水平转移可获得十字花科特有的胡豆合成酶样基因[1]。为使国内其他项目组更多地开展列当种子防除研究、研究人员能够自行采集和预处理列当种子，本文对列当种子的采集和预处理做一简要的介绍。
[1][]1材料与方法
[]11试验材料
瓜列当种子采集于新疆建设兵团第二师二十七团带有蒴果的列当的植株，向日葵列当采集于陕西省定边县周台子乡向日葵地里。采集后的植株在阴凉处晾干。采集列当种子所需要的材料包括塑料袋、手套等。
[]1列当种子的采集
在生长有列当的地里，选取颜色发黑、蒴果变黄色的植株（图1）；如果整个植株是黑色的，要注意查看蒴果是否有破裂，采集蒴果未破裂的植株。首先，将列当植株轻轻拔出并装入个嵌套好的中型塑料袋（超市购物袋即可），值得注意的是，在这里我们需要剪去列当植株偏上部的蒴果和偏下部的蒴果。将剪去头部和尾部的列当植株装袋，1个塑料袋装0～0株即可。将采集好的植株放置在阴凉的地方晾干，大约1周。然后自上向下将晾干的列当植株上的所有蒴果捋下来，再用双手用力搓开捋下的所有蒴果，将种子搓出来，并用土壤筛筛去蒴果壳和土，这样即可得到相对纯净的列当种子。
[]1列当种子前处理需要的材料和设备
列当种子、吐温0、洗洁精、土壤筛、镊子、滤纸、勺子、1 000 L烧杯、玻璃棒、光学显微镜、超声波清洗机、超净工作台、簸箕、01、0、10 g/L的G4。
[]14列当种子的预处理[]
将采集到的种子过筛提纯。将筛子由上到下按由大到小的顺序排列，依次为10、04、0、04、01 ，最下边为空盘子。过完筛之后04 筛子上的是蒴果壳，01 筛子下面底盘上的是土，其他筛子上的是列当种子和杂物的混合物，需要进一步清理。一般采用水清洗种子。将过完筛子的列当种子放入1 000 L烧杯中，并加入～ L洗洁精和适量的水，用玻璃棒搅拌。烧杯中的液体过筛（01 ），并冲洗～次，洗掉种子表面的灰尘。再将种子放入烧杯中，加入10 L表面活性剂（吐温0）和适量的水。用玻璃棒搅拌后，将烧杯放入超声波清洗机中1～ in。静置1～ in，种子出现了分层现象：上层多为未成熟的列当种子及杂质，下层则是较成熟的列当种子。取下层种子分开重复冲洗多次，将分开的列当种子冲洗干净后，放在超净工作台并晾干，选用透气性较好的网袋储藏备用。
[1][]列当种子表面消毒及预培养将清理干净的列当种子用1%（体积分数）次氯酸钠溶液超声 in，然后用蒸馏水冲洗次。再用7%（体积分数）乙醇超声波 in，用蒸馏水冲洗干净，直到洗出来的水为无色，然后在超净工作台晾干备用。
在培养皿内（直径90 ，高0 ）铺层滤纸，加入适量蒸馏水，然后在滤纸上均匀铺直径的玻璃纤维滤片（hatan G/A）约10片，将表面消毒晾干后的列当种子均匀撒到玻璃纤维滤片上，每片0～40粒，并用4 L无菌水湿润滤纸及列当种子，培养皿以Parafil封口，在 ℃的黑暗条件下预培养 d。用预培养后的列当种子分别采用01、0、10 g/L的独脚金内酯类似物GR4进行发芽试验。
[1][]结果与分析
根据我们对1个向日葵列当蒴果的计数分析可知，向日葵列当每株平均生产种子174万粒（0万～万粒）[P]，每株平均有个蒴果（～9个），每个蒴果平均生产104 g种子（9～7 g），平均千粒质量414 g （14～7 g），在种子计数过程中我们分别在多株向日葵列当的上、中、下部各采集1个蒴果进行分析（表1）。
首先，每个蒴果在上、中、下部生产的种子数均达到了 000粒以上，且不同部位的蒴果在向日葵列当种子的数量上没有显著差异；同样，上、中、下部的蒴果中的种子质量均达到了0 g 以上，但不同部位的种子质量没有显著差异；而千粒质量分别为、4、47 g，不同部位向日葵列当的千粒质量差异也不显著。虽然以上种向日葵列当的相关特性在统计分析结果上并没有显著差异，但发芽试验结果表明（表），不同部位的向日葵列当种子发芽率之间存在有显著差异，我们分别采用了种浓度的GR4来进行发芽试验，结果显示向日葵列当的中间部分的种子发芽率均为最高，且显著高于上、下部种子的发芽率，其中在0 g/L的GR4的刺激下，向日葵列当中部的发芽率最高，为44%。
根据我们对1个瓜列当硕果的计数分析，瓜列当每枝平均生产种子万粒（0万～1万粒），每枝平均有个蒴果（1～41个），每个蒴果平均生产种子17 g（17～07 g），平均千粒质量17 g （1～ g）。在种子计数过程中我们分别在多株瓜列当植株的上、中、下部各采集1个蒴果进行分析，结果显示瓜列当植株每个蒴果的中、下部产生的种子数均超过了1 00粒，而上部平均产生的种子数则未超过1 000粒，与中、下部有显著差异。但上、中、下部的蒴果的种子质量却没有显著差异，均超过了140 g，并且瓜列当植株不同部位的千粒质量也均达到了90 g以上，不同部位的种子千粒质量之间差异不显著（表）。但发芽试验结果表明，不同部位的瓜列当种子发芽率之间存在显著差异，同样在种浓度的GR4的刺激下，瓜列当的中间部分的种子发芽率均为最高，且显著高于上、下部种子的发芽率，其中在0 g/L的GR4的刺激下，瓜列当中部的发芽率最高，为91%（表4）。
[1][]结论与讨论
在采集列当种子及前期处理过程中应有严格规范，保证所采集的列当种子品质能够满足室内相关试验的科学性要求。首先，在采集时，要尽量筛选整株颜色发黑、蒴果变黄色的植株，并且根据以上试验结果得出，不同部位的列当种子发芽率之间存在显著差异，列当植株中部的种子发芽率较高，无论是向日葵列当还是瓜列当，其植株中部产生的种子发芽率均超过了0%。因此，在采集向日葵列当和瓜列当时应剪去偏上部和偏下部的蒴果，尽量保留列当植株中部的蒴果；在后期晾晒过程中，如果能够等待种子自然开裂，只收集成熟的种子，则可确保获得发芽率较高的列当种子。
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